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测IgM为较受推崇的抗体捕获法，测IgG为6点定标的定量间接法，总准确率可达到98~100%

不同品种操作完全一致，已稀释样本可多项检测

 

巨细胞病毒Ig M抗体(CMV-IgM)

酶联免疫吸附测定法（ELISA）试剂盒

捕获法

用途

CMV--IgM酶联免疫吸附测定法（ELISA）试剂盒用于体外定性检测人血清中的巨细胞病毒IgM抗体。供体外诊断使用。高度复杂的检测。

1.       引言

在世界上大多数地区，无症状的巨细胞病毒（CMV）感染通常发生于儿童期。然而，在经济富裕的地区，CMV初次感染的时期会被推迟，从而导致：

-          妊娠期感染，可导致新生儿明显或迟发的先天性异常；

-          输血之后感染，可导致CMV诱发的单核细胞增多症；

-          器官移植后因免疫抑制而发生感染，可导致恢复期并发症的发生和/或器官丧失。

如果没有实验室检查的支持，如病毒分离、IgM特异性抗体阳性或IgG特异性抗体水平显著升高，临床上不能诊断CMV感染。

1904年，Rippert描述了一种含有巨大包涵体的细胞，即CMV对细胞产生的主要解剖病理学作用（1，2）。这种疱疹病毒于50年之后首先被Smith分离出来，但“巨细胞病毒”的名称却是由Weller命名（3）。CMV可长期潜伏于人类宿主的若干种腺体和肾脏中，成为一种潜在的感染因素。与其他疱疹病毒不同的是，CMV生长缓慢，在细胞培养中产生迟发性的细胞病性作用。CMV感染的特征是形成含有巨大核周包涵体的肿胀细胞，即巨细胞。

基于血清阳性个体占总体人群比例（40-100%）的发病率研究显示，CMV感染的发生与人群的社会经济条件成反比。年龄相关性发病率研究提示，在人的一生中围产期和生殖期发生CMV感染的危险性增高（4）。围产期感染可通过宫颈分泌物和母乳来传播，而在性成熟期血清转化的突然升高则提示性病传播的可能性。

虽然产前CMV感染的发生频率较低，但它可通过胎盘由母亲传递给胎儿，并成为新生儿精神发育迟缓和其他先天性缺陷的主要感染性原因。2000名婴儿中只有1名会出现严重的巨细胞包涵体病（CID），而获得宫内无症状性感染的却有10倍之多。医学上，无症状性或“休止的”先天性感染不容忽视，因为它可能对长期发展产生影响，而又缺乏可指导临床医生做出诊断的明显临床表现（5）。

另外，还会发生两种类型的医源性CMV感染。第一种，免疫抑制治疗之后经常发生的感染复发或再燃，典型的伴随疾病为器官移植（6）或癌症治疗（7）。第二种，接受多次输血的患者通常会发生初次或再燃感染（8）。这些机会性感染多数是亚临床的，但疾病的严重程度取决于接受免疫抑制药的剂量和个体的免疫状态及能力。此外，CMV感染常见于获得性免疫缺陷综合征（AIDS）的患者。已有资料提示CMV可能与AIDS的病因学有关（9）。总体来说，在免疫受损者中初次和复发性CMV感染的发病率和死亡率均有所升高（10）。

在CMV初次感染中，抗体的产生与其他病毒感染的模式一样，即CMV IgM抗体一过性升高，而后CMV IgG抗体水平升高并可持续。感染再燃患者的CMV IgM抗体并不一定会再次出现，似乎取决于研究的患者群体（11）。由于母体的IgM不会通过胎盘屏障，因此新生儿血清中出现CMV特异性IgM抗体高度提示先天性或新生儿感染的可能性。

正如Engvall和Perlman(12,13,14)以及 Van Weeman（15）首次描述的那样，酶免疫测定法可灵敏、特异地检测和测量血清中的蛋白质。酶联免疫测定法的灵敏度、特异性和重复性均可与其他检测抗体的血清学方法如免疫荧光（IFA）、补体结合、血细胞凝集和放射免疫测定相媲美（16，17，18，19）。近来，酶免疫测定法被发展用于巨细胞病毒抗体的检测，结果显示是有用的（18）。





检测原理

ELISA依赖于生物学物质（如抗原）吸附在塑料表面如聚苯乙烯（固相）上的能力。当与固相载体结合的抗原与患者血清接触时，如果血清中存在特异性抗体，该抗体则会与抗原结合在固相载体上，形成抗原-抗体复合物。通过洗涤去除过多的抗体。之后加入辣根过氧化物酶标记的山羊抗人IgM球蛋白，后者将会与抗原-抗体复合物结合。通过洗涤去除过多的酶标记抗体，然后加入显色剂/底物四甲基联苯胺（TMB）。如果患者血清中存在特异性抗体，溶液将会呈蓝色。用1N H2SO4终止酶反应后，微孔中的溶液变成黄色。不同的颜色反映血清中不同的抗体浓度，用合适的分光光度计或酶标仪进行比色（12，13，14，15）。

 

 

2.       参考文献

1．   Rippert, H. 1904. Uerber protozoenartige Zellen in der Niere einces syphilitischen Neugeborenen und in der Parotis von Kindern. Centralb. f. Allg. Pathol. 15:943-948.

2．   Smith, M.G. 1954. Propagation of Salivary Gland Virus of the Mouse in Tissue Cultures. Proc. Soc. Exp. Biol. Med. 86:435-440.

3．   Weller, T.H., J.B. Hanshaw, D.E. Scott. 1960. Serologic Differentiation of Viruses Responsible for Cytomegalic Inclusion Disease. Virology. 12:130-132.

4．   Carlstrom, G. and B. Jalling. 1970. Cytomegalovirus Infections in Different Groups of Paediatric Patients. Act Paediatr. Scand. 59:303-309.

5．   Melish, M.E. and J.B. Hanshaw. 1973. Congenital Cytomegalovirus Infection: Developmental Progress of Infants Detected by Routine Screening. Am. J. Dis. Child. 126:190-194.

6．   Ho, M. 1982. Cytomegalovirus: Biology and Infection, NY. Plenum Medical Book Co.

7．   Bodey, G.P., P.T. Wertlake, G. Douglas, et al. 1965. Cytomegalic Inclusion Disease in Patients with Acute Leukemia. Ann. Intern. Med. 62:899-906.

8．   Prince, A.M., W. Szmuness, S.J. Millian, et al. 1971. A Serologic Study of Cytomegalovirus Infections Associated with Blood Transfusions. N. Engl. J. Med. 284:1125-1131.

9．   Fields, B.N. (ed.). 1985. T-Cell Leukemia Viruses. In: Virology. NY. Raven Press. 58:1359.

10. Fields, B.N. (ed.). 1985. Cytomegalovirus. In: Virology. NY, Raven Press 29: 645.

11. Reynolds, D.W., S. Stagno and C.A. Alford. 1979. Laboratory Diagnosis of

   Cytomegalovirus Infection. Diagnostic Procedures for Viral, Rickettsial and

   Chlamydia Infections. American Public Health Association. pp. 399 and 23.

12. Engvall, E., K. Jonsson, and P. Perlman. 1971. Enzyme-Linked Immunosorbent

   Assay, (ELISA) Quantitative Assay of Immunoglobulin G. Immunochemistry.

   8:871-874.

13. Engvall, E. and P. Perlman. 1971. Enzyme-Linked Immunosorbent Assay, ELISA.

   In: Protides of the Biological Fluids. H. Peeters, ed. Proceedings of the Nineteenth

   Colloquium, Brugge Oxford. Pergamon Press. pp 553-556.

14. Engvall, E., K. Jonsson, and P. Perlman. 1971. Enzyme-Linked Immunosorbent

   Assay. II. Quantitative Assay of Protein Antigen, Immunoglobulin-G, By Means of

   Enzyme- Labelled Antigen and Antibody-Coated tubes. Biochem. Biophys. Acta.

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15. Van Weeman, B. K. and A.H.W.M. Schuurs. 1971. Immunoassay Using

   Antigen-Enzyme Conjugates. FEBS Letter. 15:232-235.

16. Bakerman, S. 1980. Enzyme Immunoassays. Lab. Mgmt. August. pp 21-29.

17. Booth, J.C., G. Hannington, T.A.G. Aziz, et al. 1979. Comparison of enzyme-linked

   immunosorbent assay (ELISA) technique and complement-fixation test for

   estimation of cytomegalovirus IgG antibody. J. Clin. Pathol. 32:122-127.

    18.Cappel, R., F. De Cuyper, and J. De Braekeleer. 1978. Rapid detection of IgG and

       IgM antibodies for cytomegalovirus by the enzyme-linked immunosorbent assay

       (ELISA). Arch. Virol. 58:253-258.

19.Engvall, E. and P. Perlman. 1972. Enzyme-Linked Immunosorbent Assay, ELISA.

   III.Quantitation of Specific Antibodies by Enzyme-Labeled Anti-Immunoglobulins

   in Antigen-Coated Tubes. J. Immunol. 109: 129-135.

20.   CDC/NIH Interagency Working Group. 1993. In: Biosafety in Microbiological and Biomedical Laboratories. 3rd Edition. U.S. Dept. of Health and Human Services, Public Health Service. pp18-24.

21. Stagno, S., et al. 1984. Birth Defects. 20:65-85.

22. Fung J.C., R.C. Tilton. 1985. Ann. Clin. Lab. Sci. 15:204-211.

23. Stagno, S., et al. 1985. J. Clin. Microbiol. 2l:930-935.

24. Drew, W.L. 1983. Diag. Med. 6:61-66.

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   NCCLS Publication H18-A.

30. NCCLS. 1991. National Committee for Clinical Laboratory Standard. Internal

   Quality Control Testing: Principles & Definition. NCCLS Publication C24- A.

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