弓形体IgM(Toxo-IgM)
意大利进口TORCH试剂
测IgM为较受推崇的抗体捕获法，测IgG为6点定标的定量间接法，总准确率可达到98~100%
不同品种操作完全一致，已稀释样本可多项检测
样本温育只需45分钟(在同类产品中时间最短)
全部操作流程只需2~3小时(取决于样本量)，即使开展全部8项检测亦可在半个工作日内轻松完成
底物为单一底物液，简化操作，减少误差
稀释液、洗涤液、底物液、终止液均可通用
试剂及包装均有颜色标记，减少操作失误
弓形虫Ig M抗体(Toxo-IgM)
酶联免疫吸附测定法（ELISA）试剂盒
捕获法
用途:
弓形虫抗体Toxo-IgM 酶联免疫吸附测定法（ELISA）试剂盒用于检测人血清中的鼠弓形体IgM抗体。供体外诊断使用。高度复杂的检测。
1. 引言
鼠弓形体是一种球虫类寄生虫，最早在1908年从一种北非的啮齿类动物刚地梳趾鼠（Ctenodactylus gondii）的体内分离出来。之后，这种生物在多种鸟类、爬行类和哺乳类动物体内都有发现（1）。
人类的鼠弓形体感染可有多种感染源：食用了感染的肉类，特别是羊肉和猪肉，或是摄入了家猫和野猫携带的含有卵囊的污物，都有导致感染的可能（2）。也已证明该病可通过器官移植、输血传播或是静止期感染重新激活导致发病。先天性弓形体病有非常复杂的临床症状，因为各种各样临床症状的存在，在做鉴别诊断的时候，几乎要考虑所有婴儿可能发生的病症（3）。
该病的临床症状可以是非特异性的，比如贫血、脾肿大、黄疸、发热、肝肿大、淋巴结肿大和呕吐等。先天性弓形体病很容易被临床误诊，尤其是那些症状非特异性的患儿（4）。当免疫抑制患者有中枢神经系统损害的临床或实验室表现时，鉴别诊断时也必须考虑弓形体病（5）。在世界范围内，鼠弓形体是一种常见的潜伏性感染源（6）。
在后天性获得性弓形体病中，通常在感染的极早期阶段就可检测出IgM抗体，出现临床症状1或2个月之内IgM抗体水平达到峰值。IgM抗体的典型表现为：它维持可检测水平的时间只有几周（7），却可以存在长达2年之久（5）。
由于IgM型抗体不能通过胎盘屏障，所以IgM特异性抗体的检测在新生儿先天性弓形体病的诊断中起着非常重要的作用（5）。它也有助于近期获得性（急性）感染和慢性感染之间的鉴别。
酶联免疫测定法的灵敏度、特异性和重复性均可与其他检测抗体的血清学方法如免疫荧光、补体结合、血细胞凝集和放射免疫测定法相媲美（8，9，10）。
检测原理
ELISA依赖于生物学物质（如抗原）吸附在塑料表面如聚苯乙烯（固相）上的能力。当与固相载体结合的抗原与患者血清接触时，如果血清中存在特异性抗体，该抗体则会与抗原结合在固相载体上，形成抗原-抗体复合物。通过洗涤去除过多的抗体。之后加入辣根过氧化物酶标记的山羊抗人IgM球蛋白，后者将会与抗原-抗体复合物结合。通过洗涤去除过多的酶标记抗体，然后加入显色剂/底物四甲基联苯胺（TMB）。如果患者血清中存在特异性抗体，溶液将会呈蓝色。用1N H2SO4终止酶反应后，微孔中的溶液变成黄色。不同的颜色反映血清中不同的抗体浓度，用合适的分光光度计或酶标仪进行比色（9，10，11，12，13）。
血清处理
检测病毒特异性IgM抗体的固相免疫测定法同样对干扰因子敏感。本试剂盒通过在测定之前的血样处理排除了这种干扰。吸附液的使用减少了可能导致假阴性结果的竞争性病毒特异性IgG抗体的浓度。类似地，通过去除IgG、中和类风湿因子可使假阳性的可能性降至最低。
2. 使用的局限性
1) 建议使用者仔细阅读并充分理解包装盒内的说明书。为获得可靠的结果，必须严格按照说明书进行操作。正确移取样品和试剂、洗涤以及温育的时间控制对于获得正确的结果尤其重要。
2) 对免疫抑制患者的ELISA结果必须慎重解释。
3) 意义不明确的样品在重新测定后如果仍然不明确，则应用另一种替代方法，如免疫荧光测定法（IFA）。如果结果仍不明确，则应重新采样。
4) 检测不到IgM抗体并不能排除最近或目前的感染。
5) 特异性IgG抗体会与IgM抗体竞争同一位点而导致假阴性。相反，在特异性IgG抗体存在时类风湿因子会导致假阳性（15，16）。吸附液可减少样品中的竞争性病毒特异性IgG抗体，并使类风湿因子的干扰降至最低。研究显示，试剂盒吸附液所能去除的IgG最大量为血清中IgG正常高限（1380mg/dL）的超出量。检测到的RF最高效价（1：2560；1000 IU/ml）并没有对测定结果造成负面影响。
6) 在一些ELISA检测中，某些抗核抗体会导致假阳性反应。
7) 强烈建议同时检测新生儿及其母亲的血样。只有当排除了母体IgM抗体通过胎盘进入胎儿体内的情况，新生儿血清中出现IgM抗体才能考虑为先天性感染。另外，如果婴儿的确是先天性感染，IgM抗体（与IgG抗体）水平会持续或升高；然而如果抗体来自母体，抗体水平的下降会与其半衰期相一致。
8) 本品的检测结果应由临床医生结合其他临床表现和诊断方法来解释。
9) 本试剂盒并不是为了检测患者的免疫状态，而是用于检测某人对弓形体的抗体反应，从而提示弓形体活动性感染。
3. 参考文献
1．Feldman, H.A. 1974. Toxoplasmosis: An Overview. Bull. N.Y. Acad. Med. 50:110-127.
2．Jacobs, L. 1974. Toxoplasma gondii: Parasitology and Transmission. Bull. N.Y. Acad. Med. 50:128-145.
3．Eichenwald, H.F. 1959. A study of Congenital Toxoplasmosis with Particular Emphasis on Clinical Manifestations, Sequelae and Theraphy. In: Human Toxoplasmosis. Si, J.C., ed. Vol. 2. Munksgaard, Copenhagen.
4．Alford, C.A., Jr., S. Stagno, and D.W. Reynolds. 1974. Congenital Toxoplasmosis: Clinical, Laboratory, and Therapeutic Considerations, with Special Reference to Subclinical Disease.
Bull. N.Y. Acad. Med. 50:160-181.
5．Remington, J.S. 1974. Toxoplasmosis In the Adult. Bull. N.Y. Acad. Med. 50:211-227.
6．Beattie, C.P. 1967 Toxoplasmosis. In: Recent Advances in Medical Microbiology. Waterson, A.P., ed. pp 318-351.
7．Fraser, K.B., P.V. Shirodaria, and C.F. Standford. 1971. Fluorescent Staining and Human IgM. Br. Med. J. 3:707.
8．Walls, K.W. 1978. Serodiagnosis of Toxoplasmosis. Lab. Mgmt. January: 26-31.
9．Bakerman, S. 1980. Enzyme Immunoassays. Lab. Mgmt. August:21-29.
10. Engvall, E., K. Jonsson, and P. Perlman. 1971. Enzyme-Linked Immunosorbent Assay, (ELISA) Quantitative Assay of Immunoglobulin G. Immunochemistry. 8:871-874.
11. Engvall, E. and P. Perlman. 1971. Enzyme-Linked Immunosorbent Assay, ELISA. In: Protides of the Biological Fluids. H. Peeters, ed. Proceedings of the Nineteenth Colloquium, Brugge Oxford. Pergamon Press. pp 553-556.
12. Engvall, E., K. Jonsson, and P. Perlman. 1971. Enzyme-Linked Immunosorbent Assay. II. Quantitative Assay of Protein Antigen, Immunoglobulin-G, By Means of Enzyme- Labelled Antigen and Antibody-Coated tubes. Biochem. Biophys. Acta. 251: 427-434.
13. Van Weeman, B. K. and A.H.W.M. Schuurs. 1971. Immunoassay Using Antigen-Enzyme Conjugates. FEBS Letter. 15:232-235.
14. Engvall, E. and P. Perlman. 1972. Enzyme-Linked Immunosorbent Assay, ELISA. III. Quantitation of Specific Antibodies by Enzyme-Labeled Anti-Immunoglobulins in Antigen-
Coated Tubes. J. Immunol. 109: 129-135.
15. CDC/NIH Interagency Working Group. 1993. Biosafety in Microbiological and Biomedical Laboratories. 3rd Edition. U. S. Dept. of Health and Human Services, Public Health Service. pp
18-24.
16. National Committee for Clinical Laboratory Standards. 1990. Procedures for the Collection of Diagnostic Blood Specimens by Venipuncture Approved Standard. NCCLS Publication H18-A.
17. NCCLS. 1991. National Committee for Clinical Laboratory Standard. Internal Quality Control Testing: Principles & Definition. NCCLS Publication C24- A.
18. http://www.cap.org/html/ftpdirectory/checklistftp.html. 1998. Laboratory General - CAP (College of American Pathology) Checklist (April 1998). pp 28-32.
19. NCCLS. 1997. National Committee for Clinical Laboratory Standard. Preparation and Testing of Reagent Water in the Clinical Laboratory. NCCLS Publication C3- A3.
